Què és la hibridació in situ fluorescent (FISH)?
La tècnica FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) és una tècnica de diagnòstic molecular que permet la identificació i localització in situ de seqüències específiques d’ADN en cromosomes. El seu principal objectiu és detectar anomalies cromosòmiques com aneuploïdies, duplicacions, delecions i translocacions. Per detectar aquestes anomalies, s’utilitzen sondes fluorescents (fragments curts d’ADN) que s’uneixen a seqüències específiques de l’ADN i emeten fluorescència quan s’observen sota un microscopi de fluorescència.
Aquesta tècnica s’utilitza àmpliament en l’àmbit mèdic, però en el context de la reproducció assistida s’utilitza principalment per a l’anàlisi d’espermatozoides, el diagnòstic genètic preimplantacional (PGT) i en estudis de cèl·lules fetals.
La tècnica FISH es realitza en tres passos fonamentals:
- Fixació de la mostra (espermatozoides, cèl·lules embrionàries, cèl·lules fetals, etc.) en un portaobjectes.
- Addició de les sondes fluorescents que s’uneixen als cromosomes diana.
- Anàlisi mitjançant microscòpia de fluorescència.
Com es detecten les anomalies cromosòmiques?
- Aneuploïdies: Les aneuploïdies són alteracions en el nombre de cromosomes. Una de les més conegudes és la síndrome de Down, on en lloc d’haver-hi 2 còpies del cromosoma 21, n’hi ha 3. En aquest cas, la FISH mostrarà tres senyals en el cromosoma 21, en lloc de 2.
- Delecions i duplicacions: es detecten per l’absència o l’excés de fluorescència en regions específiques dels cromosomes.
- Translocacions: una translocació és un canvi genètic en què un tros de cromosoma es trenca i s’uneix a un altre cromosoma. La FISH identifica aquests canvis mitjançant la reubicació dels senyals fluorescents en cromosomes no corresponents.
La tècnica FISH és un mètode de diagnòstic ràpid, específic i molt versàtil, ja que pot utilitzar-se tant en l’anàlisi de gàmetes com d’embrions. Tot i això, té algunes limitacions, com ara que només pot analitzar un nombre limitat de cromosomes (entre 5 i 9) i que és una tècnica destructiva, ja que les cèl·lules analitzades no poden utilitzar-se en tractaments posteriors.
Quan està indicada aquesta tècnica?
- En pacients amb fracassos d’implantació en cicles previs amb ICSI convencional.
- En casos d’avortaments de repetició.
- Edat avançada de l’home.
- Antecedents d’embarassos amb cromosomopaties.
- Pacients que han rebut ràdio o quimioteràpia.
- Infertilitat d’origen desconegut.